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紫外可見分光光度計的原理

    紫外可見分光光度計的工作原理:基于朗伯-比耳(Lambert-Beer)定律,即物質在一定濃度下的吸光度與它的吸收介質的厚度呈正比。
通常表述為:當一束平行的單色光通過某一均勻的有色溶液時,溶液的吸光度與溶液的濃度和光程的乘積成正比,其數學表達式如下:
A=-lg( It/I0 )= - lgT= =εbC
式中,A 為吸光度;I0為入射的單色光強度;It為透射的單色光強度;T為物質的透射率;ε為摩爾吸光系數(L·mol-1·cm-1);b為被吸收層厚度(cm),即比色皿的光程;C為物質的摩爾濃度(mol·L-1);


紫外可見分光光度計的光譜范圍

    常見的紫外-可見分光光度計的波長范圍為190-1100 nm。通常所指的可見光譜范圍為400-700 nm,是指被人眼能感知到的光譜范圍,200-400 nm為紫外光譜范圍。一般,在可見區測試的樣品必須是有色物質。


紫外可見分光光度計常見應用

    紫外-可見分光光度計廣泛應用于制藥、醫療衛生、化工、能源、機械、冶金、環保、地質、食品、生物、材料、農業、林業、漁業等行業,在高等教育、計量科學和科研院所中的教學、科研領域,以及生產中的質量控制,原材料和產品檢驗等各方面發揮著重要作用,是理化實驗室常用的分析儀器。

具體應用如下:

1)核酸、蛋白濃度測量以及細菌生長濃度測量。

2)食品、水質、合金等樣品中的金屬元素(如鐵、錳、鎘、銅、鋁等)及非金屬元素(如硅、磷/磷酸鹽、硝酸鹽、硫酸鹽、氟化物等)分析。

3)與其他分析儀器聯用,并進行定性分析,如有機化合物的分析、藥物分析。常見的 分析手段如:與標準物及標準圖譜對照;比較最大吸收波長吸收系數的一致性。


紫外可見分光光度計的維護、保養

    紫外-可見分光光度計屬于精密儀器,在運行過程中因工作環境、操作方法等原因,其電子和光學元器件的性能可能會發生改變,進一步影響設備性能,甚至引起設備故障或事故。因此,分析工作者必須了解紫外-可見分光光度計的基本原理和操作方法,遇到故障現象時可快速做出判斷并及時聯系廠家維修,確保設備的正常運行。

儀器的安裝應滿足下列條件要求:

1)溫濕度要求:儀器應安放于干燥的房間,使用溫度在5℃~35℃范圍內,相對濕度≤85%。

2)電源要求:額定電壓為220V ± 22V AC (或110V±11V AC),頻率為50Hz (或60Hz),應有良好的接地。建議使用1000W以上的電子交流穩壓器或交流穩壓器,以加強儀器的抗干擾性能。

3)其它工作條件:應避開有強烈振動和持續振動的場所;避免放在有陽光直接照射和有較大氣流擾動、以及有腐蝕性氣體和灰塵多的場所;應遠離發出磁場、電場和高頻電磁波的電氣裝置;應放置于可承重的穩定水平臺面,建議儀器背部距墻壁至少 15cm 以上,以保持有效的通風散熱。


紫外可見分光光度計操作的簡要操作步驟

1)開機、自檢

2)功能選擇

3)波長設定

4)調0A或100%T

5)測量


紫外可見分光光度計的使用方法

1)溶液裝入比色皿約2/3高度處為宜;盡量避免氣泡的產生;若溶液殘留在比色皿外壁,應及時擦拭干凈(先用濾紙吸干,然后用擦鏡紙輕拭光面);對于易揮發的樣品,建議使用比色皿蓋;盡量避免沾污樣品架,否則應及時擦去樣品架上殘留液體。

2)比色皿使用完畢應及時清洗,并用適當的方法清洗,若清洗不當或沒有清洗干凈,也會影響測量結果的準確度和穩定性。

3)測試過程中,若某一光源不用,可選擇將其關閉,以延長燈的使用壽命;儀器不用時,請及時關機、并拔掉電源插頭,以防止雷雨天氣可能造成的損壞。

4)請勿擅自拆卸儀器外殼和內部零部件,尤其是光路結構部分,切勿隨意松動其緊固螺釘和螺母;請勿隨意觸碰各光學表面(包括光源),以免影響儀器的正常工作、甚至造成人為損壞。

5)保持儀器表面和工作環境的清潔;杜絕使用汽油、乙醚等有機溶液擦拭儀器外殼;儀器不用時可用防塵罩進行防護。

6)儀器應避免長期不用,建議定期開機確保其能正常運轉;溫、濕度較高的地區應特別注意防潮。


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